高效液相色谱仪测定酸枣仁中的酸枣仁皂苷A含量

高效液相色谱仪测定

酸枣仁中的酸枣仁皂苷A含量

2018年4月

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1摘要

    本文根据《中国药典》2015版要求，测定中药饮片酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量的高效液相色谱方法，按中国药典条件，适当调整柱温，酸枣仁皂苷A保留时间RSD%在0.38%，峰面积RSD%为1.78%。

关键词：中药饮片 酸枣仁 酸枣仁皂苷A  E800蒸发光散射检测器  高效液相色谱

酸枣仁皂苷A是一种从酸枣仁上提取出来的皂苷中的一种。酸枣仁皂苷A具有养肝、宁心、安神、敛汗的功效，主治虚烦不眠、惊悸怔忡、烦渴、虚汗。

酸枣仁中含两种三萜化合物（白桦脂醇、白桦脂酸）和酸枣皂苷及苷元等功效成分。酸枣仁皂苷A为酸枣仁皂苷类的一种

2检测部分

2.1仪器

本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。具体配置为H6000系列的两台输液泵、一台E800蒸发光散射检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器；sainaer色谱工作站。

2.2  分析条件

色谱柱：SAINAER  C18 4.6*250mm  5um

流速：1ml/min

柱温：35℃

气体流量：3L/min

蒸发温度：80℃

进样量：10μL

流动相：乙腈和水

梯度洗脱：

时间（min）      A:乙腈%      B：水%

0~15             20→40                80→60

15~28            40           60

28~30            40→70                60→30

30~32            70→100              30→0

2.3  标准品溶液的配制和样品处理

标准品品溶液的制备  取酸枣仁皂苷A对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

样品溶液的制备  取酸枣仁粉末（过四号筛）约1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚（60～90℃）适量，加热回流4小时，弃去石油醚液，药渣挥去溶剂，转移至锥形瓶中，加入70%乙醇20ml，加热回流2小时，滤过，滤渣用70%乙醇5ml洗涤，合并洗液与滤液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即制得桔梗样品溶液。

3结果

3.1   赛那尔色谱工作站中对照品的色谱图

3.2   线性关系

将配制浓度为0.1mg/ml的标准溶液，分别精密吸取对照品溶液2μL、5μL、10μL、15μL、20μL，供试品溶液，注入H6000高效液相色谱仪，测定，以峰面积对数为纵坐标，已进样量对数为横坐标绘制工作曲线，所得曲线良好，R达到0.999以上。标准品的浓度及峰面积的结果见表1。

3.3   精密度试验

0.1mg/ml的酸枣仁皂苷A标准品连续测定6次，考察方法的精密度，保留时间和峰面积的RSD%结果如表2所示：

3.4   样品测试

使用2.3配制好的酸枣仁样品溶液得出图4图谱：

4结论

经测试，本方法的工作曲线好R=0.999以上。数据重现性好，保留时间RSD%=0.38%（n=6），小于国家要求0.5%以内，峰面积RSD%=1.78%（n=6），小于国家要求2.0%以内。并且峰形完好，拖尾因子为1.02。说明此方法适用于检测酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量。

5客户现场照片