高效液相色谱仪测定山茱萸中的莫诺苷和马钱苷含量

高效液相色谱仪测定

山茱萸中的莫诺苷和马钱苷含量

2018年4月

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1摘要

    本文根据《中国药典》2015版要求，使用赛那尔H6000高效液相色谱仪测定中药山茱萸中莫诺苷和马钱苷含量的高效液相色谱方法，按中国药典条件，设置色谱柱柱温为35℃，莫诺苷保留时间RSD%在0.23%，峰面积RSD%为0.77%；马钱苷保留时间RSD%在0.33%，峰面积RSD%为1.00%。

关键词：中药 山茱萸 莫诺苷 马钱苷E800 ELSD H6000高效液相色谱仪HPLC

莫诺苷具有保护细胞免于H₂O₂诱导的细胞毒性和细胞凋亡的作用，可作为一种神经保护类药物。

马钱苷属环烯醚萜苷类,是山茱萸中的主要药效成分之一。其具有对非特异性免疫功能有增强作用，能促进巨噬细胞吞噬功能，延缓衰老。有良好的防癌防辐射功效，作为新型抗癌类药物广泛应用在临床药物。有良好的抗炎，抗菌作用，作为常用的中成药物原料添加。此外还有镇咳，祛痰等作用。 

2检测部分

2.1仪器

本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。具体配置为H6000系列的两台高压输液泵、一台紫外-可见光检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器；sainaer色谱工作站。

2.2  分析条件

色谱柱：SAINAER C18 4.6*250mm  5um

流速：1ml/min

柱温：35℃

检测波长：240nm

进样量：10μL

流动相：乙腈和0.3%磷酸

梯度洗脱：

时间（min）     A:乙腈%           B：0.3%磷酸%

0~20                7                 93

20~50             7→20                              93→80

2.3  标准品溶液的配制和样品处理

标准品品溶液的制备  取莫诺苷对照品、马钱苷对照品适量，精密称定，加80%甲醇制成每1ml各含50μg的混合溶液，即得。

样品溶液的制备  取山茱萸粉末（过三号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3结果

3.1   赛那尔色谱工作站中对照品的色谱图

3.2   线性关系

将配制浓度各为50μg/ml的莫诺苷、马钱苷标准溶液，分别精密吸取对照品溶液2μL、4μL、6μL、8μL、10μL注入H6000高效液相色谱仪，测定，以峰面积为横坐标，已进样量为纵坐标绘制工作曲线，所得曲线良好，R达到0.999以上。标准品的浓度及峰面积的结果见表1。

3.3   精密度试验

50ug/ml的莫诺苷、马钱苷标准品连续测定6次，考察方法的精密度，保留时间和峰面积的RSD%结果如表2所示：

3.4   样品测试

使用2.3配制好的山茱萸样品溶液得出图4图谱：

4结论

经测试，本方法的工作曲线好R=0.999以上。数据重现性好，莫诺苷保留时间RSD%=0.23%（n=6），小于国家要求0.5%以内，峰面积RSD%=0.77%（n=6），小于国家要求2.0%以内；马钱苷保留时间RSD%=0.33%（n=6），小于国家要求0.5%以内，峰面积RSD%=1.00%（n=6），小于国家要求2.0%以内。并且峰形完好，拖尾因子为1.01。说明此方法适用于检测山茱萸中莫诺苷和马钱苷的含量。

5客户现场照片