高效液相色谱仪化学键合固定相的性能评价
* 来源: 无锡赛那尔 * 作者: sainaer * 发表时间: 2018-08-10 13:46:29
高效液相色谱仪化学键合固定相的重复性、改性完全程度可通过残余羟基、覆盖度和覆盖均匀性表示，测定和评价的方法有微量元素分析法、色谱法和光谱法等。
一、微量元素分析法：
直接测定键合相的碳含量。
1、表面键合官能团浓度：
C%=（键合相中 C 的重量/载体的重量）×100%
（1）商品键合相：2%～29%
（2）甲基硅烷键合相：3%～4%
（3）十八烷基硅烷键合相：20%
由于 C% 随基质比表面积和键合有机基团的分子量的变化而变化，在研究工作中常采用表面键合相浓度α表示，即单位表面积所含键合相的浓度（umol/m2）。
α=W/（M×S）
式中：W 为 1 g 载体上键合有机官能团的质量（ug），M 为键合有机官能团的摩尔质量（g/mol），S 为载体比表面积（m2/g）。
2、表面碳覆盖率：
即硅胶表面含碳的质量百分数。
C%=（12×NC×W/M×106）×100%
式中：12 为碳的原子量，NC 为键合有机官能团的碳数，W 和 M 含义同上。
3、有机官能团的表面覆盖度：
即在单位表面积上已键合的有机官能团的量（umol）与可反应的硅醇基的量（umol）之比。
二、色谱法：
用非极性键合相填料正相洗脱的方法检查残余羟基的含量，即用庚烷作流动相。若残余羟基很少，则象甲醇和丙酮等极性化合物的保留时间与 tM 相近，且峰形对称。若残余羟基很多，则情况相反。这种评价方法较为客观。
三、光谱法：
基于 Si－OH 基在 3750 cmˉ1 处有特征的红外吸收谱带，获得某些信息。
一、微量元素分析法：
直接测定键合相的碳含量。
1、表面键合官能团浓度：
C%=（键合相中 C 的重量/载体的重量）×100%
（1）商品键合相：2%～29%
（2）甲基硅烷键合相：3%～4%
（3）十八烷基硅烷键合相：20%
由于 C% 随基质比表面积和键合有机基团的分子量的变化而变化，在研究工作中常采用表面键合相浓度α表示，即单位表面积所含键合相的浓度（umol/m2）。
α=W/（M×S）
式中：W 为 1 g 载体上键合有机官能团的质量（ug），M 为键合有机官能团的摩尔质量（g/mol），S 为载体比表面积（m2/g）。
2、表面碳覆盖率：
即硅胶表面含碳的质量百分数。
C%=（12×NC×W/M×106）×100%
式中：12 为碳的原子量，NC 为键合有机官能团的碳数，W 和 M 含义同上。
3、有机官能团的表面覆盖度：
即在单位表面积上已键合的有机官能团的量（umol）与可反应的硅醇基的量（umol）之比。
二、色谱法：
用非极性键合相填料正相洗脱的方法检查残余羟基的含量，即用庚烷作流动相。若残余羟基很少，则象甲醇和丙酮等极性化合物的保留时间与 tM 相近，且峰形对称。若残余羟基很多，则情况相反。这种评价方法较为客观。
三、光谱法：
基于 Si－OH 基在 3750 cmˉ1 处有特征的红外吸收谱带，获得某些信息。
上一条: 形成高效液相色谱仪化学键合固定相的必要条件
下一条: 提高色谱仪柱效的途径
关闭返回