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液相色谱仪应用实例一

* 来源 : 无锡赛那尔 * 作者 : sainaer * 发表时间 : 2019-01-29

例1.稠环芳烃分析(环境气体分析)

  样品:含六苯并苯等8种稠环芳烃的混合物

  色谱仪: 液相色谱仪,配有色谱工作站

  检测器:UV紫外检测器,340nm

  色谱柱:C18键合相(ODS-224),5μm,柱长25cm,柱径4.6mm

  流动相:甲醇-二氯甲烷(8:2)混合溶剂

  流速:1mL/min

  进样:20μL

  结果:所有组分在25min之内全部流出,各组分完全分离,组分出峰顺序为:六苯并苯,二苯二萘嵌苯,三苯二萘嵌苯,苯萘并二萘嵌苯,四苯二萘嵌苯,萘六苯并苯,二苯萘并二萘嵌苯,苯菲并五苯。

  例2.磺胺分析(药物分析)

  样品:磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基异�唑和甲氧苄氨嘧啶的混合物

  色谱仪: 液相色谱仪,740色谱数据处理机

  检测器:UV481型紫外检测器,波长240nm

  色谱柱:μ-BondapakC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm

  流动相:由KH2PO4(0.05mol/L)和Na2HPO4(0.05mol/L)以及MeOH所组成,其用量比例为200:10:165,

  流速:1mL/min

  进样:10μL

  结果:所有组分在6min之内全部流出,各组分完全分离,组分出峰顺序为:磺胺保留时间为2.60min,磺胺嘧啶保留时间为3.18min、磺胺甲基异�唑保留时间为4.33min,甲氧苄氨嘧啶保留时间为5.19min。

  例3.银杏内酯分析(药物分析)

  样品:含银杏苦内酯等4种物质的混合物

    色谱仪: 液相色谱仪

  配有570自动进样器,Rheadyane77251进样阀,HP化学工作站

  检测器:500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器

  漂移管温度为91℃,氮气流速为2.75L/min

  色谱柱:PlatinumOPS,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm

  流动相:水:甲醇:四氢呋喃=75:20:10

  流速:1mL/min

  进样:10μL

  结果:所有组分在15min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为银杏苦内酯C,峰2为白果内酯,峰3银杏苦内酯A,峰4为银杏苦内酯B。

  例4.脂肪酸甲酯分析(药物分析)

  样品:含5种脂肪酸甲酯的混合物

  色谱仪:液相色谱仪,配有色谱工作站

  检测器:500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器

  漂移管温度为45℃,氮气流速为1.5L/min

  色谱柱:SilverImpregnatedIon-Exchange,柱长25cm,柱径4.6mm

  流动相:乙腈:甲醇=2:98

  流速:0.75mL/min

  进样:10μL

  结果:所有组分在10min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为C18:0脂肪酸甲酯,峰为C18:1脂肪酸甲酯,峰3为C18:2脂肪酸甲酯,峰4为C18:3脂肪酸甲酯,峰1为C20:4脂肪酸甲酯。

  例5.茶碱分析(茶叶)

  样品:含茶碱等三种物质的混合物

  检测器:UV紫外检测器,280nm

  色谱柱:MicroμBondapakC18,8μm,柱长25cm,柱径4.6mm

  流动相:二甲基二酰胺:甲醇:醋酸:水=23.5:1:0.5:75(v/v)

  流速:1mL/min

  进样:10μL

  结果:所有组分8min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为可可碱,峰2为茶碱,峰3为咖啡碱。

  例6.脂肪酸直接分析

  样品:未经衍生处理的亚麻酸等6组分的混合物

  色谱仪:液相色谱仪,四元梯度泵,色谱工作站

  检测器:500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器

  漂移管温度为65℃,氮气流速为2.0L/min

  色谱柱:AlltimaTMC18,5μm,柱长25cm,柱径2.1mm

  流动相:A为水,B为乙腈

  梯度时间0min10min15min20min

  A13%20%20%5%

  B77%80%80%95%

  流速:0.4mL/min

  进样:20μL

  结果:所有组分20min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为亚麻酸,峰2为肉豆蔻酸,峰3为亚油酸,峰4为棕榈酸,峰5为油酸,峰6为硬脂酸。

  例7:氨基酸衍生物分析(食品分析)

  样品:22种氨基酸的苯基乙酰硫脲混合物

  色谱仪:液相色谱仪,梯度洗脱装置,色谱工作站

  检测器:UV紫外检测器,波长254nm

  色谱柱:柱长25cm,柱径0.46cmZorbaxODS柱(Dupont)

  流动相:A液为0.01mol/L的NaAc,pH=4.5

  B液为CH3CN

  梯度:0min~6minB/A=24/76~42/58(v/v)

  6min~14minB/A=42/58(v/v)

  14min~20minB/A=24/76(v/v)

  流速:1mL/min

  进样:自动进样器进样10μL

  结果:所有组分在20min之内全部流出,各组分完全分离,组分出峰顺序为:峰1为ASP,峰2为GLU,峰3为ASN,峰4为SER,峰5为GLN,峰6为THR,峰7为GLY,峰8为MET・SO2,峰9为HYP,峰10为ALA,峰11为TYR,峰12为HIS,峰13为CYS(CH2),峰14为VAL,峰15为MET,峰16为PRO,峰17为TRP,峰18为LYS,峰19为PHE,峰20为ILE,峰21为LEU,峰22为ARG。

  例8.氨基酸直接分析

  样品:12种未衍生氨基酸混合物溶液(1mMol/L)

  色谱仪:液相色谱仪,四元梯度泵

  配有二极管阵列检测器、蒸发光散射检测器和化学工作站

  检测器:500型ELSD蒸发光散射检测器

  漂移管温度为95℃,氮气流速2.5L/min

  色谱柱:AlltimaC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm

  流动相:A为含0.1%TFA的水

  B为含0.1%TFA的乙腈

  梯度:时间0min5min20min

  A液100%100%60%

  B液0%0%40%

  流速:0.6mL/min

  进样:20μL

  结果:所有组分在25min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为丝氨酸,峰2为赖氨酸,峰3为谷氨酸,峰4为精氨酸,峰5为脯氨酸,峰6为缬氨酸,峰7为甲硫氨酸,峰8为酪氨酸,峰9为异亮氨酸,峰10为亮氨酸,峰11为苯丙氨酸,峰12为组氨酸。

  例9.糖类分析(食品分析)

  样品:含果糖等6种糖类物质的混合物

  色谱仪:液相色谱仪,四元梯度泵,色谱工作站

  检测器:MarkⅡA型ELSDAlltech蒸发光散射检测器

  漂移管温度为100℃,氮气流速为2.2L/min。

  色谱柱:Absorbosphere,NH2,柱长25cm,柱径4.6mm

  流动相:A为乙腈,B为水

  梯度:时间0min20min

  A85%75%

  B15%25%

  流速:1.5mL/min

  进样:20μL

  结果:所有组分在24min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序依次为:峰1为果糖,峰2为葡萄糖,峰3为蔗糖,峰4为麦芽糖,峰5为乳糖,峰6为棉籽糖。

  例10.嘌呤分析(药物分析)

  样品:取1mL血浆加入200μL的1.98mol/L的高氯酸(GR),再加入600μL蒸馏水和200μL的1.47mol/L的别嘌呤醇(内标),用旋转混合器振摇10s于1200g离心10min,取上层清液备分析用。

  色谱仪:液相色谱仪,配有色谱工作站

  检测器:UV紫外检测器,254nm

  色谱柱:μBondapskC18,10μm,柱长30cm,柱径3.9mm

  流动相:0.02mol/L的磷酸二氢钾,pH=2.2

  流速:2.0mL/min

  进样:10μL

  结果:所有组分在12min之内全部流出,各组分分离完全,保留时间依次为:尿嘌呤为3.18min(峰1),腺嘌呤为3.21min(峰2),次黄嘌呤为3.90min(峰3),5-羟基吡嗪酸为4.75min(峰4),5-羟基吡嗪胺为5.31min(峰5),黄嘌呤为5.90min(峰6),吡嗪酸为7.35min(峰7),内标别嘌呤醇为8.53min(峰8),吡嗪胺为9.57min(峰9)。