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液相色谱仪操作规程

* 来源 : 无锡赛那尔 * 作者 : sainaer * 发表时间 : 2019-01-21
一开机

1打开送液泵电源,打开排液阀(反时针旋转180度),按purge键进行排气泡的操作,确认输液管路中无气泡时停止该操作,将排液阀旋回到原位置。

2.设定流速,平衡柱子30分钟[Fun]+“流速”+[enter]

3.打开测器电源,设定波长[Fun]+“波长”+[enter]+[CE]

4.打开工作站(积分仪),设定相关参数

二.进样及数据采集

进样方法:插针,搬起,注入,搬下,拔针。

三数据处理及打印报告

四关机:

1.数据采集完毕即可关闭测器;

2.泵更换甲醇冲洗流路30分钟(如使用缓冲盐流动相请先用水冲洗流路10分钟);

3.关泵

*注意事项:

1流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用045u或更细的膜过滤)。

2流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。

3不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

4使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子(一小时),然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20以上。

5长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如甲醇等),因为纯水易长霉。

6每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

7C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。

8堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀查并清洗。清洗方法;①以异丙醇作溶剂冲洗:②放在异丙醇中间用超声波清洗;用10%稀硝酸清洗。

9气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

10如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。

11要注意柱子的PH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。

12更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边清洗,然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。

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