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高效液相色谱仪测定黄芩中的黄芩苷含量

* 来源 : 无锡赛那尔 * 作者 : sainaer * 发表时间 : 2018-04-20


 

高效液相色谱仪测定

黄芩中的黄芩苷含量

 

20184

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  

 

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1摘要


    本文根据《中国药典》2015版要求,使用H6000高效液相色谱仪测定中药饮片黄芩中黄芩苷含量的高效液相色谱方法,按中国药典条件,适当调整柱温,黄芩苷保留时间RSD%0.12%,峰面积RSD%1.23%

关键词:中药饮片 黄芩 黄芩苷  H6000高效液相色谱仪 HPLC

黄芩苷(baicalin)是从双子叶唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根中提取分离出来的一种黄酮类化合物,常温下为淡黄色粉末,味苦。难溶于甲醇、乙醇、丙酮、微溶于氯仿和硝基苯、几乎不溶于水,可溶于热乙酸。遇三氯化铁显绿色,遇乙酸铅生成橙色的沉淀。溶于碱及氨水 初显黄色,不久则变为黑棕色。

具有显著的生物活性,具有抑菌、利尿、抗炎、降胆固醇、抗血栓形成、缓解哮喘 、泻火解毒、止血、安胎、抗变态反应及解痉作用,也为哺乳动物肝脏涎酶的特异性抑制剂,具有调节某些疾病的作用,也具有较强的抗癌反应生理效能。

 

2检测部分

 

2.1仪器


本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。具体配置为H6000系列的两台输液泵、一台紫外可见光检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器;sainaer色谱工作站。


 

2.2  分析条件


色谱柱:SAINAER  C18 4.6*250mm  5um

流动相:甲醇:0.2%磷酸=47:53V/V

流速:1.00ml/min

柱温:30

检测波长:280nm

进样量:10μL

等度洗脱



2.3  标准品溶液的配制和样品处理


标准品品溶液的制备  取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml60μg的溶液,即得。

样品溶液的制备  取黄芩中粉约0.3g,精密称定,加70%乙醇40ml,加热回流3小时,放冷,滤过,滤液置100ml量瓶中,用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣,洗液滤入同一量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀。精密量取1ml,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即完成样品溶液的制备。

 

3结果

 

3.1   标样的色谱图


 

3.2   线性关系


将配制浓度为60μg/ml的标准溶液,分别吸取体积2μl, 4μl, 6μl, 8μl10μl进样采集数据,以峰面积为纵坐标,进样体积为横坐标绘制工作曲线,所得曲线良好,R达到0.999以上。标准品的浓度及峰面积的结果见表1

  

 

3.3   精密度试验


60μg/ml的黄芩苷标准品连续测定6次,考察方法的精密度,保留时间和峰面积的RSD%结果如表2所示:

 


3.4   样品测试


使用2.3配制好的黄芩样品溶液得出图4图谱:


 

 

4结论


经测试,本方法的工作曲线好,R=0.999以上。数据重现性好,保留时间RSD%=0.12%n=6),小于国家要求0.5%以内,峰面积RSD%=1.23%n=6),小于国家要求2.0%以内。并且峰形完好,拖尾因子为1.01。说明此方法适用于检测黄芩中黄芩苷的含量。

 


5客户现场照片