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高效液相色谱仪测定地肤子中的地肤子皂苷Ic含量

* 来源 : 无锡赛那尔 * 作者 : sainaer * 发表时间 : 2018-04-20


 

高效液相色谱仪测定

地肤子中的地肤子皂苷IC含量


 

20184

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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1摘要


   本文根据《中国药典》2015版要求,测定中药地肤子中地肤子皂苷Ic含量的高效液相色谱方法,按中国药典条件,使用赛那尔E800蒸发光散射检测器,设置色谱柱柱温为30℃,地肤子皂苷Ic保留时间RSD%0.17%,峰面积RSD%1.43%

关键词:中药 地肤子 地肤子皂苷Ic  E800 蒸发光散射检测器  高效液相色谱 HPLC

地肤子呈扁球状五角星形,直径13mm。外被宿存花被,表面灰绿色或浅棕色,周围具膜质小翅5枚,背面中心有微突起的点状果梗痕及放射状脉纹510条;剥离花被,可见膜质果皮,半透明。种子扁卵形,长约1mm,黑色。气微,味微苦。

地肤子的有效成分地肤子皂苷Ic具有清热利湿、祛风止痒等功效,地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)是地肤子中药中抗瘙痒,抗炎和抗过敏作用的主要有效成分。

 

    




图1 地肤子皂苷Ic结构式


2检测部分

 

2.1仪器


本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。具体配置为H6000系列的两台输液泵、一台E800蒸发光散射检测器检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器;sainaer色谱工作站。


2.2  分析条件


色谱柱:SAINAER C18 4.6*250mm 5um

流速:1ml/min

柱温:30

气体流量:2.5L/min

蒸发温度:80

进样量:10μL

流动相:甲醇:0.2%冰醋酸=85:15V/V

等度洗脱

2.3  标准品溶液的配制和样品处理


标准品品溶液的制备  取地肤子皂苷Ic对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml0.5mg的溶液,即得。

样品溶液的制备  取地肤子粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,放置过夜,超声处理30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即可得到地肤子样品溶液。


3结果

 

3.1   赛那尔色谱工作站中对照品的色谱图



 


3.2   线性关系


将配制浓度为0.5mg/ml的地肤子皂苷Ic标准溶液,分别精密吸取对照品溶液2μL4μL6μL8μL10μL,注入H6000高效液相色谱仪,测定,以峰面积对数为横坐标,已进样量对数为纵坐标绘制工作曲线,所得曲线良好,R达到0.999以上。标准品的浓度及峰面积的结果见表1

 

 图3 地肤子皂苷Ic的标准曲线  

          


3.3   精密度试验


0.5mg/ml的地肤子皂苷Ic标准品连续测定6次,考察方法的精密度,保留时间和峰面积的RSD%结果如表2所示:

 

3.4   样品测试


使用2.3配制好的地肤子样品溶液得出图4图谱:

  

4 地肤子样品图谱(峰1为地肤子皂苷Ic

  


4结论


经方法测试,本方法的工作曲线好,R=0.999以上。数据重现性好,地肤子皂苷Ic保留时间RSD%=0.17%n=6),小于国家要求0.5%以内,峰面积RSD%=1.43%n=6),小于国家要求3.0%以内;并且峰形完好,拖尾因子为1.03。说明药典2015版中方法适用于检测地肤子皂苷Ic的含量。

 


5客户现场照片